Cy5 NHS ester

Cy5 NHS ester (Cyanine5 NHS ester) est un colorant fluorescent émettant dans le rouge utilisé pour le marquage des groupes amino dans les peptides, les protéines et les oligonucléotides[1]. L'excitation et l'émission se font respectivement à 646 et 669 nm[2].

Solution de Cy5 NHS ester à 10 mg/ml dans le DMSO. Le colorant fluorescent émettant dans le rouge et réactif aux amines Cy5 NHS ester a été utilisé pour réagir avec le groupe amino libre sur l'acide aminé cystéine présent dans les peptides terminaux utilisés pour la terminaison des chaînes de pBAE[1]. D'autre part, 1 mg de colorant Cy5 NHS ester a été dissous dans 0,1 ml de tampon tétraborate de sodium 62,5 mM (pH 8,5). Après ajout de L-méthionine en saturation, le mélange a été incubé toute la nuit à 4°C. La méthionine conjuguée au fluorophore (Cy5-Met) a été purifiée par chromatographie en phase inverse sur un système HPLC Agilent utilisant une colonne C18[3].

References:
[1].Brugada-Vilà P, Cascante A, et al. Oligopeptide-modified poly(beta-amino ester)s-coated AdNuPARmE1A: Boosting the efficacy of intravenously administered therapeutic adenoviruses. Theranostics. 2020 Feb 3;10(6):2744-2758.
[2].Jiménez Sánchez G, et al. Fluorescent Radiosensitizing Gold Nanoparticles. Int J Mol Sci. 2019 Sep 18;20(18):4618.
[3].Kim JM, Seong BL. Highly chromophoric Cy5-methionine for N-terminal fluorescent tagging of proteins in eukaryotic translation systems. Sci Rep. 2017 Sep 14;7(1):11642.