GW4869 |
| カタログ番号GC19186 |
GW4869は、非競合的な中性スフィンゴミエリナーゼ阻害剤であり、IC50は1μMである。
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Cas No.: 6823-69-4
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
GW4869は、非競合的な中性スフィンゴミエリナーゼ阻害剤であり、IC50は1μMである。
GW4869（10μM）はTNF誘導性のスフィンゴミエリン（SM）加水分解を部分的に抑制し、20μMの化合物は完全にSMの減少から保護される。10-20μMのGW4869の添加は、初期のセラミドの蓄積を完全に抑制するが、その効果は後の時間（24時間後）では部分的に失われる。GW4869の作用はグルタチオンの低下の下流で起こる。GW4869は、細胞死からの有意な保護効果を投与依存的に示す。これらの保護効果は、ミトコンドリアからのシトクロムcの放出とカスパーゼ9の活性化の有意な抑制とともに伴う。したがって、N-SMase活性化がミトコンドリア機能障害の上流で起こることを示している。
GW4869の予処置は、RAW264.7マクロファージにおけるエクソソームとプロ炎症サイトカイン（TNF-α、IL-1β、IL-6）の放出を有意に阻害する。LPS処理またはCLP手術後12時間後、GW4869で処置されたWTマウスは、血清中のエクソソームとプロ炎症サイトカインの量が、コントロールのPBS投与マウスよりも低くなる。これに応じて、GW4869の治療は、敗血症誘発性の心臓炎症を軽減し、心筋の抑制を緩和し、生存期間を延長する。
References:
[1]. Luberto C, et al. Inhibition of tumor necrosis factor-induced cell death in MCF7 by a novel inhibitor of neutralsphingomyelinase. J Biol Chem. 2002 Oct 25;277(43):41128-39.
[2]. Essandoh K, et al. Blockade of exosome generation with GW4869 dampens the sepsis-induced inflammation and cardiac dysfunction. Biochim Biophys Acta. 2015 Nov;1852(11):2362-71.
[3]. Nakamura H, et al. Sphingomyelin Regulates the Activity of Secretory Phospholipase A2 in the Plasma Membrane. J Cell Biochem. 2015 Sep;116(9):1898-907.
| 細胞実験[1]: | |
細胞株 | MCF7ヒト乳がん細胞 |
準備方法 | GW-4869は、DMSO中の1.5mmストック懸濁液として-80℃で日常的に保存されていた。使用直前に、5％メタンスルホン酸（MSA）を添加して懸濁液を可溶化した（滅菌二重蒸留水中の5％MSA 2.5μlをGW4869ストック懸濁液50μlに添加した；したがって、実験時のGW-4869ストック溶液の濃度は1.43mmであった）。懸濁液を混合し、37℃で透明になるまで加温した。 |
反応条件 | 30分 |
アプリケーション | GW4869はIC50が1μMの非競合性中性スフィンゴミエリナーゼ（N-SMase）阻害剤である。GW4869（10μm）はTNF誘発スフィンゴミエリン（SM）の加水分解を部分的に阻害し、20μmの化合物はSMの消失を完全に防御した。GW4869の作用は、N-SMaseの活性化の上流で起こることが以前に示されたグルタチオンの低下の下流で起こった。GW4869は、TNFが介在する他の重要なシグナル伝達作用を阻害しない。GW4869は、用量依存的に、核凝縮、カスパーゼ活性化、PARP分解、トリパンブルー取り込みによって測定される細胞死を有意に防ぐことができた。 |
| 動物実験 [2]: | |
動物モデル | 雄性野生型C57BL/6マウス |
準備方法 | |
投与形態 | DMSO(0.005%)に溶解したGW 4869を、偽手術またはCLP手術前に1回2.5μg/gを腹腔内注射した。 |
アプリケーション | RAW264.7マクロファージにおけるエクソソームおよび炎症性サイトカイン（TNF-α、IL-1β、IL-6）の放出は、GW 4869の前投与により有意に抑制された。GW4869で前処理したWTマウスは、対照のPBS注射マウスよりも血清中のエクソソームと炎症性サイトカインの量が少なかった。従って、GW4869投与は敗血症誘発の心臓炎症を減少させ、心筋抑制を減弱し、生存期間を延長させた。 |
参考文献: [1]. Luberto, Chiara, et al. ""Inhibition of tumor necrosis factor-induced cell death in MCF7 by a novel inhibitor of neutral sphingomyelinase."" Journal of Biological Chemistry 277.43 (2002): 41128-41139. [2]. Essandoh, Kobina, et al. ""Blockade of exosome generation with GW4869 dampens the sepsis-induced inflammation and cardiac dysfunction."" Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Molecular Basis of Disease 1852.11 (2015): 2362-2371. | |
| Cas No. | 6823-69-4 | SDF | |
| Chemical Name | 3,3'-(1,4-phenylene)bis[N-[4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl]-dihydrochloride-2-propenamide | ||
| Canonical SMILES | O=C(NC1=CC=C(C2=NCCN2)C=C1)/C=C/C3=CC=C(/C=C/C(NC4=CC=C(C5=NCCN5)C=C4)=O)C=C3.[H]Cl.[H]Cl | ||
| Formula | C30H30Cl2N6O2 | M.Wt | 577.5 |
| 溶解度 | Water : < 0.1 mg/mL (insoluble);DMSO : 0.044 mg/mL (0.08 mM) | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
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1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.7316 mL | 8.658 mL | 17.316 mL |
| 5 mM | 0.3463 mL | 1.7316 mL | 3.4632 mL |
| 10 mM | 0.1732 mL | 0.8658 mL | 1.7316 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
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- Purity: >98.00%
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-
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Eur J Med Res 27.1 (2022): 1-9. PMID: 35820962 IF: 4.9809 -
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Arch Biochem Biophys (2024): 109960. PMID: 38513770 IF: 3.9003
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 4 reference(s) in Google Scholar.)
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