Biotin-XX Tyramide Reagent (Synonyms: biotin-LC-LC-tyramide) |
| Catalog No.GC12033 |
Biotin-XX Tyramide Reagent는 에이징트가 중개하는 타이라미드 신호 증폭(TSA)을 위한 비오틴 유도체이다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Biotin-XX Tyramide Reagent는 에이징트가 중개하는 타이라미드 신호 증폭(TSA)을 위한 비오틴 유도체이다. Biotin-XX Tyramide Reagent는 호세라드시스페로시드아제(HRP)를 이용하여 고정된 에이징트 옆에 비오틴 레이블을 공유적으로 쌓아 넣다. 쌓인 레이블은 브라이트 필드나 플루오레상현미경으로 영상을 얻기 위해 스트레프타비딘 결합물로 감지할 수 있다. 레이블링 반응은 빠르게 진행된다(10분 미만)[1]. Biotin-XX Tyramide Reagent는 면역조직화학의 민감도를 높이는데 사용할 수 있다[2].
References:
[1] Hopman AH, Ramaekers FC, Speel EJ. Rapid synthesis of biotin-, digoxigenin-, trinitrophenyl-, and fluorochrome-labeled tyramides and their application for In situ hybridization using CARD amplification. J Histochem Cytochem. 1998 Jun;46(6):771-7.
[2] Freedman LJ, Maddox MT. A comparison of anti-biotin and biotinylated anti-avidin double-bridge and biotinylated tyramide immunohistochemical amplification. J Neurosci Methods. 2001 Nov 15;112(1):43-9.
이 프로토콜은 지침을 제공고 사용자의 필요에 따라 수정되어야 합니다.
1.타이라미드 신호 증폭 (TSA) 준비
1.타이라미드 신호 증폭 (TSA) 준비: 문헌[1]의 방법을 참고하여 TSA를 다음과 같이 준비했습니다: Biotin-XX Tyramide (품번: GC12033), DAPI 포함 항색변형 마운팅 매디엄 (품번: GC26283), HRP-결합 스트레프타비딘 (품번: GC26343), 스트레프타비딘-FITC (품번: GC19886), TNT 버퍼 (pH 7.5) (0.1 M 트리스-HCl, 0.15 M NaCl, 0.05% 트윈 20을 포함), TNB 버퍼 (TNT 버퍼 + 0.5% BSA).
2.HRP 스트레프타비딘 결합:
① TNB 버퍼로 비오틴 표시된 헤라 세포를 30분 동안 차단합니다.
② HRP 스트레프타비딘을 TNB 버퍼에서 1:1000으로 희석하여 헤라 세포에 추가하고 30분 동안 발효시킵니다.
③ TNT 버퍼로 세포를 세 번 씻어냅니다. (TNB 버퍼의 BSA는 차단제로 사용됩니다).
3.TSA 증폭:
① 증폭 작업 용액에서 헤라 세포를 10분 동안 차단합니다 (증폭 작업 용액에는 0.1 M 보라트 버퍼 (pH 8.5)에 1 μg/mL Biotin-XX Tyramide Reagent (BXXP)와 1 mM H2O2가 녹아 있습니다).
② TNT 버퍼로 세 번 씻어냅니다.
4. 스트레프타비딘-FITC 결합:
① TNB 버퍼로 비오틴 표시된 헤라 세포를 20분 동안 차단합니다.
② TNB 버퍼에 1.0 μg/mL 스트레프타비딘-FITC를 추가한 후 헤라 세포를 추가하고 30분 동안 발효시킵니다.
③ TNT 버퍼로 세포를 세 번 씻어냅니다.
5. 형광 현미경:
①현미경 슬라이드에 DAPI를 포함한 항색변형 장착 매체 (10 μL)을 추가합니다.
② 24웰 판에서 헤라 세포가 있는 유리 커버리프를 뾰족한 핀셋으로 제거하고 DAPI가 포함된 항색변형 마운팅 매디엄 위에 추가합니다 (세포 면을 아래로).
③ 자외선 발생과 방출 광 조건이 495nm/525nm (녹색)인 상황에서 형광 현미경으로 관찰합니다.
References:
[1]Bai J, Guo F, Li M, Li Y, Lei X. Click-based amplification: designed to facilitate various target labelling modes with ultralow background amplification. RSC Chem Biol. 2021 Mar 20;2(3):906-916.
| Cas No. | SDF | ||
| Synonyms | biotin-LC-LC-tyramide | ||
| Chemical Name | N-(4-hydroxyphenethyl)-6-(6-(5-((3aS,4S,6aR)-2-oxohexahydro-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl)pentanamido)hexanamido)hexanamide | ||
| Canonical SMILES | O=C1N[C@@]([H])([C@]([H])(CS2)N1)[C@@H]2CCCCC(NCCCCCC(NCCCCCC(NCCC3=CC=C(O)C=C3)=O)=O)=O | ||
| Formula | C30H47N5O5S | M.Wt | 589.79 |
| Solubility | ≥ 59mg/mL in DMSO, ≥ 14.1 mg/mL in EtOH with ultrasonic | Storage | Store at -20°C |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.6955 mL | 8.4776 mL | 16.9552 mL |
| 5 mM | 0.3391 mL | 1.6955 mL | 3.391 mL |
| 10 mM | 0.1696 mL | 0.8478 mL | 1.6955 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >98.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 9 reference(s) in Google Scholar.)
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