Coelenterazine 400a |
| Catalog No.GC43290 |
Coelenterazine 400a는 천연 코엘렌테라진의 유래물로 레닐라 루시페라제(Rluc)의 기질로 기능하고 최대 발산 장파가 400nm이다.
Products are for research use only. Not for human use. We do not sell to patients.
Cas No.: 70217-82-2
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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Coelenterazine 400a는 천연 코엘렌테라진의 유래물로 레닐라 루시페라제(Rluc)의 기질로 기능하고 최대 발산 장파가 400nm이다. Rluc가 존재하는 상황에서 Coelenterazine 400a는 분자 산소와 반응하여 고에너지 중간체를 형성하고 그 결과로 빛을 발산한다[3][4]. 그의 최소한의 형광 수용체의 간섭으로 인해 그것은 생물발광 공명 에너지 전달(BRET) 검사의 이상적인 선택으로 이 검사는 보통 단백질-단백질 상호작용을 평가하기 위해 사용된다[5][6].
References:
[1]. Sousa J, Magalhães CM, González-Berdullas P, et al. Comparative Investigation of the Chemiluminescent Properties of a Dibrominated Coelenterazine Analog. Int J Mol Sci. 2022 Jul 30;23(15):8490. doi: 10.3390/ijms23158490. PMID: 35955625; PMCID: PMC9369366.
[2]. Markova SV, Vysotski ES. Coelenterazine-dependent luciferases. Biochemistry (Mosc). 2015 Jun;80(6):714-32. doi: 10.1134/S0006297915060073. PMID: 26531017.
[3]. Min CG, Ferreira PJO, Pinto da Silva L. Theoretically obtained insight into the mechanism and dioxetanone species responsible for the singlet chemiexcitation of Coelenterazine. J Photochem Photobiol B. 2017 Sep;174:18-26. doi: 10.1016/j.jphotobiol.2017.07.012. Epub 2017 Jul 20. PMID: 28750319.
[4]. Vacher M, Fdez Galván I, Ding BW, et al. Chemi- and Bioluminescence of Cyclic Peroxides. Chem Rev. 2018 Aug 8;118(15):6927-6974. doi: 10.1021/acs.chemrev.7b00649. Epub 2018 Mar 1. PMID: 29493234.
[5]. Ming-Liang Yuan, Tian-Yu Jiang, Lu-Pei Du, et al. Luminescence of coelenterazine derivatives with C-8 extended electronic conjugation. Chinese Chemical Letters. 2016, 27(04): 550-554 https://doi.org/10.1016/j.cclet.2016.02.011
[6]. Li J, Wang X, Dong G, et al. Novel furimazine derivatives for nanoluciferase bioluminescence with various C-6 and C-8 substituents. Org Biomol Chem. 2021 Sep 22;19(36):7930-7936. doi: 10.1039/d1ob01098k. PMID: 34549229.
BRET 검사에서 Coelenterazine 400a에 대한 실험 프로토콜
1. 원액의 준비: 100% 에탄올이나 메탄올에 Coelenterazine 400a를 녹여 농도 1mM의 원액을 준비합니다. 원액을 나눠 -20°C나 -80°C의 어두운 곳에 보관합니다.
2. 검체의 준비: 적절한 매체에서 세포를 재배하여 70-80%의 혼잡도에 이르게 합니다. 적합한 전염제를 사용하여 Renilla luciferase와 형광 수용체 플라스미드를 함께 전염합니다. 전염 후 충분한 단백질 표현을 보장하기 위해 24-48시간 동안 세포를 계속 재배합니다.
3. 기판의 준비 용액: 사용하기 전에 Coelenterazine 400a 원액을 세포 재배 매체로 100μM 농도로 희석합니다.
4.BRET 검사: 전염된 세포를 세척하고 인산완충 식염수 (PBS)에 소생시킨 후 96웰의 화이트 마이크로 플레이트의 각 컵에 90μL의 세포 소생된 용액을 추가합니다. 각 컵에 10μL의 기질 용액을 추가하여 최종 농도를 10μM로 만듭니다.
5.형광 측정: Coelenterazine 400a를 추가한 후 멀티모드 마이크로 플레이트 리더를 사용하여 발광강도를 측정합니다.
이 프로토콜은 지침을 제공하고 사용자의 구체적인 필요에 따라 수정되어야 합니다.
References:
[1]. Bery N, Rabbitts TH. A Cell-based Screening Method Using an Intracellular Antibody for Discovering Small Molecules Targeting Hard-to-drug Proteins. Bio Protoc. 2022 Feb 20;12(4):e4324. doi: 10.21769/BioProtoc.4324. PMID: 35340285; PMCID: PMC8899552.
| Cas No. | 70217-82-2 | SDF | |
| Canonical SMILES | O=C1C(CC2=CC=CC=C2)=NC3=C(CC4=CC=CC=C4)NC(C5=CC=CC=C5)=CN31 | ||
| Formula | C26H21N3O | M.Wt | 391.5 |
| Solubility | 1mg/mL in DMSO, Ethanol: 0.5 mg/mL, Methanol: 0.5 mg/mL | Storage | Store at -20°C,protect from light |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.5543 mL | 12.7714 mL | 25.5428 mL |
| 5 mM | 0.5109 mL | 2.5543 mL | 5.1086 mL |
| 10 mM | 0.2554 mL | 1.2771 mL | 2.5543 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
- View current batch:
- Purity: >97.00%
- COA (Certificate Of Analysis)
- SDS (Safety Data Sheet)
- Datasheet
Average Rating: 5 (Based on Reviews and 37 reference(s) in Google Scholar.)
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