DiD perchlorate (Synonyms: D 307, DiIC18(5), NK 3175) |
| Catalog No.GC30543 |
DiD perchlorate는 친질성 형광 염료로 빨리며 안정적으로 인질세포막에 통합되어 세포、세포기능、지질체、바이러스、지단백질을 표시하기 위해 널리 사용된다.
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Cas No.: 127274-91-3
Sample solution is provided at 25 µL, 10mM.
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DiD perchlorate는 친질성 형광 염료로 빨리며 안정적으로 인질세포막에 통합되어 세포、세포기능、지질체、바이러스、지단백질을 표시하기 위해 널리 사용된다. DiD는 선명한 빨간 형광을 보여주고 이는 살아있는 세포의 다색 영상화와 형광 유세포 분석을 돕다[2]. DiD perchlorate는 모우의 대동맥 내피세포와 쥐의 해마 조직에서의 지질막과 내수성 세포기능을 표시하기 위해 사용되었다[3]. DiD는 또한 유방암 세포계열의 증식을 형광 유세포 분석을 통해 평가하기 위해 사용되었고 DiD 표현이 높은 세포군은 낮은 증식과 관련이 있다[3]. DiD는 비세포 독성이고 피하에 이식된 PC3 세포에서는 3주 후까지 검출할 수 있다[4]. DiD는 633nm 헬륨-네온(He-Ne) 레이저로 자극할 수 있고 Dil보다 더 긴 자극 및 방출 파장이 있어 배경 형광이 있는 세포와 조직을 표시하기에 특히 적합한다.
References:
[1]. Yumoto, K., Berry, J.E., Taichman, R.S., et al.A novel method for monitoring tumor proliferation in vivo using fluorescent dye DiDCytometry A.85(6)548-555(2014).
[2]. Dailey, M.E., and Waite, M.Confocal imaging of microglial cell dynamics in hippocampal slice culturesMethods18(2)222-230(1999).
[3]. Lin, C.P., Lynch, M.C., and Kochevar, I.E.Reactive oxidizing species produced near the plasma membrane induce apoptosis in bovine aorta endothelial cellsExp. Cell Res.259(2)351-359(2000).
[4]. Ribeiro, T., Raja, S., Rodrigues, A.S., et al.NIR and visible perylenediimide-silica nanoparticles for laser scanning bioimagingDyes Pigments110227-234(2014)
이 프로토콜은 지침을 제공하고 사용자의 구체적인 요구에 따라 수정되어야 합니다.
1.세포막 염색 용액 준비
(1) DMSO나 EtOH 저장 용액 준비: 저장 용액은 DMSO나 EtOH로 만들어져 농도는 1~5mM입니다. 예를 들어, 25mg의 DiD(분자량: 959.91g/mol)를 5.21ml의 무수 DMSO에 넣고 완전히 녹여 5mM의 재고 용액을 얻습니다.
노트: 사용하지 않은 재고 용액은 -20°C에서 포장하여 보관하고 반복적인 동결과 해동을 피하십시오.
(2) 작업 용액 준비: 적합한 버퍼(예: 무혈청은 배양액, HBSS 또는 PBS)로 재고 용액을 희석하여 농도가 0.5-5 μM인 작업 용액을 준비합니다.
노트: 작업 용액의 최종 농도는 다양한 세포 계열과 실험 시스템에 따라 최적화되어야 합니다. 추천 농도에서 시작하여 10배 범위 내에서 최적 농도를 탐색하는 것이 좋습니다.
2.흡수세포 염색
(1) 4°C에서 1000-1500rpm의 속도로 흡수세포를 3-5분간 원심 분리하고 상층액을 버립니다. PBS로 두 번 세척하고 각각 5분씩입니다.
(2) 1 mL의 DiD perchlorate 작업 용액을 추가하고 실온에서 5-30분 동안 배양합니다.
노트: 다양한 세포에는 최적의 배양 시간이 다르고 20분을 초기 배양 시간으로 사용한 후 최적화하여 일관된 표시 결과를 보장할 수 있습니다.
(3)배양 후 1000-1500rpm의 속도로 5분간 원심분리하여 상층액을 제거하고 PBS로 2-3회 세척하고 각각 5분씩입니다.
(4) 미리 데운 무혈청은 배양액이나 PBS로 세포를 재해석합니다. 형광 현미경이나 형광 유사세포 분석기를 이용하여 관찰합니다.
3.점착세포 염색
(1) 무균의 커버슬립에 점착세포를 배양합니다.
(2) 배양액에서 커버슬립을 제거하고 과잉 배양액을 흡인하고 커버슬립을 습한 환경에 놓습니다.
(3) 커버슬립의 한 구석에 100μL의 염료 작업 용액을 추가하고 살짝 흔들어 염료가 모든 세포를 균일하게 덮도록 합니다.
(4) 실온에서 5-30분 동안 인컵합니다. 다양한 세포에는 최적의 배양 시간이 다르고 20분을 초기 배양 시간으로 사용한 후 최적화하여 일관된 표시 결과를 보장할 수 있습니다.
(5) 배양 후 염료 작업 용액을 버리고 미리 데운 배양 용액으로 커버슬립을 2-3회 세척합니다.
4.현미경 검사: DiD perchlorate의 자극/방출 광선은 각각 650/670nm입니다.
노트:
1)형광 염료에는 끌어알 문제가 있고 형광 끌어알을 늦추기 위해 빛을 피해주세요.
2)안전과 건강을 위해 작업 시 실험복과 일회용 장갑을 착용해 주시기 바랍니다.
| Cas No. | 127274-91-3 | SDF | |
| Synonyms | D 307, DiIC18(5), NK 3175 | ||
| Canonical SMILES | CCCCCCCCCCCCCCCCCCN1C2=C(C=CC=C2)C(C)(C)/C1=C\C=C\C=C\C3=[N+](C4=C(C=CC=C4)C3(C)C)CCCCCCCCCCCCCCCCCC.O=Cl(=O)([O-])=O | ||
| Formula | C61H99ClN2O4 | M.Wt | 959.9 |
| Solubility | DMSO: 50 mg/mL (52.09 mM) | Storage | Store at -20°C,protect from light, stored under nitrogen,unstable in solution, ready to use. |
| General tips | Please select the appropriate solvent to prepare the stock solution according to the
solubility of the product in different solvents; once the solution is prepared, please store it in
separate packages to avoid product failure caused by repeated freezing and thawing.Storage method
and period of the stock solution: When stored at -80°C, please use it within 6 months; when stored
at -20°C, please use it within 1 month. To increase solubility, heat the tube to 37°C and then oscillate in an ultrasonic bath for some time. |
||
| Shipping Condition | Evaluation sample solution: shipped with blue ice. All other sizes available: with RT, or with Blue Ice upon request. | ||
| Prepare stock solution | |||
|
1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 1.0418 mL | 5.2089 mL | 10.4178 mL |
| 5 mM | 0.2084 mL | 1.0418 mL | 2.0836 mL |
| 10 mM | 0.1042 mL | 0.5209 mL | 1.0418 mL |
Step 1: Enter information below (Recommended: An additional animal making an allowance for loss during the experiment)
g
μL
Step 2: Enter the in vivo formulation (This is only the calculator, not formulation. Please contact us first if there is no in vivo formulation at the solubility Section.)
Calculation results:
Working concentration: mg/ml;
Method for preparing DMSO master liquid: mg drug pre-dissolved in μL DMSO ( Master liquid concentration mg/mL, Please contact us first if the concentration exceeds the DMSO solubility of the batch of drug. )
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next addμL PEG300, mix and clarify, next addμL Tween 80, mix and clarify, next add μL ddH2O, mix and clarify.
Method for preparing in vivo formulation: Take μL DMSO master liquid, next add μL Corn oil, mix and clarify.
Note: 1. Please make sure the liquid is clear before adding the next solvent.
2. Be sure to add the solvent(s) in order. You must ensure that the solution obtained, in the previous addition, is a clear solution before proceeding to add the next solvent. Physical methods such as vortex, ultrasound or hot water bath can be used to aid dissolving.
3. All of the above co-solvents are available for purchase on the GlpBio website.
Quality Control & SDS
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