Sudan Red 7B (Synonyms: C.I. 26050, Ceres Red 7B, Fat Red 7B, Hexatype Carmine B, NSC 326202, Solvent Red 19)

Este plan solo proporciona una guía; por favor, modifícalo según tus necesidades específicas.

1. Preparación de la solución

(1) Solución de trabajo: Disolver Sudan Red 7B en DMF o DMSO, diluir la solución madre con el tampón experimental y preparar la concentración de trabajo requerida.

Nota: Ajusta la concentración de trabajo óptima según la situación real o consulta la literatura para establecer una concentración en gradiente por ti mismo. La solución de trabajo debe prepararse y utilizarse de inmediato.

2. Uso de Sudan Red 7B para detectar la estructura de la cutícula del endospermo[1] (Literatura de referencia, solo para consulta)

(1) Las muestras se fijaron durante la noche en un tampón fosfato (pH 7.2, que contenía 4% de formaldehído y 0.25% de glutaraldehído) a 4°C. Al inicio de la fijación, las semillas secas se perforaron con una aguja fina, y todas las muestras se infiltraron bajo vacío. Luego, las muestras se incrustaron en partículas de agarosa al 1.5%, se deshidrataron en una serie de etanol gradualmente y se incrustaron en parafina. Se cortaron secciones de 12 μm de grosor utilizando un micrótomo.

(2) Las secciones se incubaron con Sudan Red 7B disuelto en una mezcla 1:1 (v/v) de polietilenglicol 400 y glicerol al 90% (v/v) a una concentración final de 0.1% (p/v) durante 15 minutos.

(3) Lava las secciones con agua y móntalas en glicerol. Examina las muestras bajo un microscopio.

Nota: Para tu seguridad y salud, usa bata de laboratorio y guantes desechables durante la operación.

Referencias:

[1]Loubéry S, De Giorgi J, Utz-Pugin A, et al. Una cutícula del endospermo depositada de manera materna contribuye a los defectos fisiológicos de las semillas transparentes de testa[J]. Plant physiology, 2018, 177(3): 1218-1233.